Biologie moléculaire :

  • Choix du plasmide de production
  • Etiquette utilisée et sa position dans la séquence
  • Optimisation des séquences pour éviter les codons rares

Expression de protéines :

  • En bactéries Escherichia coli (BL21(DE3) pLysS, Rosetta, etc) :
    • Sous forme soluble
    • Sous forme de corps d’inclusion puis renaturation, notamment pour les CMH/peptide, MR1 et MicA
  • En cellules eucaryotes stables ou transitoires de mammifères (CHO-K, CHO-S, ExpiCHO) et d’insectes (S2)

Purification de protéines ou peptides par chromatographie liquide :

  • Exclusion stérique
  • Echange d’ions
  • Interactions hydrophobes
  • Phase inverse
  • Affinité

Endotoxines :

  • Titration avec kit lysat d’amoebocytes de limule (LAL)
  • Elimination par colonne d’affinité